El Gran Asedio de Malta (maltés: L-Assedju l-Kbir) ocurrió en 1565 cuando el Imperio Otomano intentó conquistar la isla de Malta, entonces en manos de los Caballeros Hospitalarios. El asedio duró casi cuatro meses, del 18 de mayo al 11 de septiembre de 1565.

Los Caballeros Hospitalarios tenían su sede en Malta desde 1530, después de haber sido expulsados ​​de Rodas, también por los otomanos, en 1522, tras el asedio de Rodas. Los otomanos intentaron por primera vez tomar Malta en 1551, pero fracasaron. En 1565, Solimán el Magnífico, el sultán otomano, hizo un segundo intento de tomar Malta. Los Caballeros, que sumaban alrededor de 500 junto con aproximadamente 6.000 soldados de a pie, resistieron el asedio y repelieron a los invasores. Esta victoria se convirtió en uno de los acontecimientos más célebres de la Europa del siglo XVI, hasta el punto de que Voltaire dijo: "Nada es más conocido que el sitio de Malta". Sin duda, contribuyó a la eventual erosión de la percepción europea de la invencibilidad otomana, aunque el Mediterráneo siguió siendo disputado entre coaliciones cristianas y turcos musulmanes durante muchos años. Imperio por el control del Mediterráneo, una contienda que incluyó el ataque turco a Malta en 1551, la destrucción otomana de una flota cristiana aliada en la batalla de Djerba en 1560 y la decisiva derrota otomana en la batalla de Lepanto en 1571.